rccs悬浮细胞旋转培养-乾芸仪器科技7-青岛培养

       细胞传代的一般操作方法是在开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全，一般主要有细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(mem-0.2%lh 培养液或mem 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、庆大溶液（1 万单位）、7.5％nahc03 溶液、0.25％胰蛋白酶、pbs 洗液等。工具有小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至少15 分钟高压灭菌)、c02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱等；

       操作步骤一般是镜检细胞，挑选生长状态---，青岛培养，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可x疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制mem-0.2%lh 培养液100ml 内，加入灭活小牛血x清10m1，庆大溶液0.3m1，7.5%碳---钠溶液3ml。（仅供一般参考）。---细胞；先用pbs 洗液冲洗细胞表面1-2 次，每次10m1，rccs悬浮细胞旋转培养，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使---液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。

       以上方法仅供参考！