微重力效应模拟-rccs-4h

细胞传代的一般方法？

       开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(mem-0.2%lh 培养液或mem 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血x清、庆大溶液（1 万单位）、7.5％nahc03 溶液、0.25％胰蛋白酶、pbs 洗液。

      用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至

少15 分钟高压灭菌)、c02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱

      操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态---，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可x疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制mem-0.2%lh 培养液100ml 内，加入灭活小牛血x清10m1，庆大溶液0.3m1，7.5%碳---钠溶液3ml。（仅供一般参考）。---细胞；先用pbs 洗液冲洗细胞表面1-2 次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使---液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，rccs-4h，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。

rccs?具有普通培养装置的三大特点:

(1) 高分化度: rccs使高分化的人体组织能在实验室中生长，模仿感兴趣的器1官和肿1瘤。

(2) 模拟微重力: 以前要在体---拟正常组织的微环境因细胞外基质太复杂和难适应环境而受阻，rccs-2hd，而细胞外基质对于调节细胞骨架和细胞核基质蛋白非常重要。rccs使分裂原本应在一起的细胞组织成分的重力问题得到解决。

(3) 三维细胞培养: 而普通生物反应器1因要保持细胞的悬浮而产生剪切力。其破坏了细胞间和细胞与基质间的稳定，使组织和细胞集中于自身的修复， 而---影响其生长和其它的正常生理功能。发孝罐主要培养大量细1菌， 不适于大量培养人及其它哺乳动物细胞组织，因很难把大量的细胞移植到发孝罐中， 即使能够培养， 所得的细胞数也有限且很难生成组织。而rccs行且可用于---生产，其细胞的成活率平均为97%且分化度---。